方案概述
前言：
三嗪類農(nóng)藥是一類以三嗪環(huán)為核心結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物，主要用于農(nóng)業(yè)除草、殺蟲(chóng)等領(lǐng)域。多數(shù)三嗪類除草劑通過(guò)抑制植物光合作用光系統(tǒng)Ⅱ（PSⅡ）中的D1蛋白，阻斷電子傳遞鏈，使植物無(wú)法合成ATP和NADPH等能量物質(zhì)，導(dǎo)致雜草因“能量饑餓”而死亡。部分新型三嗪類除草劑（如茚嗪氟草胺）作用靶標(biāo)為纖維素合成酶，抑制細(xì)胞壁合成，影響植物生長(zhǎng)。部分三嗪類除草劑對(duì)皮膚和眼睛有刺激作用，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示可能具有致癌、致畸風(fēng)險(xiǎn)，長(zhǎng)期接觸可能對(duì)人體健康產(chǎn)生潛在危害。三嗪類除草劑在土壤中殘留期較長(zhǎng)，可能通過(guò)雨水淋溶或地表徑流污染水體，對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)造成潛在危害。
本次實(shí)驗(yàn)參考《土壤和沉積物 11種三嗪類農(nóng)藥的測(cè)定 高效液相色譜法》（HJ 1052-2019），采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3400系列配置紫外檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，試驗(yàn)結(jié)果顯示，11種三嗪類農(nóng)藥峰型良好且分離度大于1.5；標(biāo)準(zhǔn)品溶液（25.0mg/L）連續(xù)進(jìn)樣6針保留時(shí)間重復(fù)性RSD值均在0.18%以下，峰面積重復(fù)性RSD值均在0.75%以下，儀器精密度良好；在線性范圍內(nèi)，各組分線性相關(guān)系數(shù)均大于0.9999，線性良好；在土壤樣品中添加1.0mg/L的標(biāo)準(zhǔn)品濃度，11種三嗪類農(nóng)藥的回收率在82.16%~90.61%之間，回收率良好；某土壤樣品中未檢測(cè)出上述11種三嗪類農(nóng)藥殘留。
關(guān)鍵詞：三嗪類農(nóng)藥；高效液相色譜法；紫外檢測(cè)器。
1.儀器設(shè)備及試劑
1.1 高效液相色譜配置清單
表1 儀器配置清單表
|
序號(hào) |
名稱 |
數(shù)量 |
|
1 |
LC3400液相色譜系統(tǒng) |
1臺(tái) |
|
2 |
P3400B 二元高壓泵 |
1臺(tái) |
|
3 |
CT3400 柱溫箱 |
1臺(tái) |
|
4 |
AS3400 自動(dòng)進(jìn)樣器 |
1臺(tái) |
|
5 |
UV3400紫外檢測(cè)器 |
1臺(tái) |
|
6 |
SmartLab CDS 2.0色譜工作站 |
1套 |
1.2 試劑及標(biāo)準(zhǔn)品清單
表2 試劑及標(biāo)品清單表
|
序號(hào) |
試劑及標(biāo)準(zhǔn)品 |
純度 |
|
1 |
無(wú)水硫酸鈉 |
分析純 |
|
2 |
乙腈 |
色譜純 |
|
3 |
11種三嗪類農(nóng)藥混標(biāo)溶液（500mg/L） |
/ |
|
4 |
丙酮 |
分析純 |
|
5 |
二氯甲烷 |
分析純 |
|
6 |
正己烷 |
色譜純 |
1.3 液相色譜條件
表3 高效液相色譜條件
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色譜柱 |
C18 5μm, 4.6x250mm |
|
流速 |
1.0mL/min |
|
柱溫 |
30℃ |
|
流動(dòng)相 |
流動(dòng)相A:乙腈；流動(dòng)相B:水 |
|
波長(zhǎng) |
222nm |
|
進(jìn)樣量 |
10μL |
1.4 實(shí)驗(yàn)材料及輔助設(shè)備
分析天平；
超聲波清洗機(jī)；
渦旋混合器；
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；
2.實(shí)驗(yàn)方法
2.1 試劑配制
2.1.1 11種三嗪類農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)工作液：精密移取11種三嗪類農(nóng)藥混標(biāo)溶液（500mg/L）1.0mL，置于5mL容量瓶中，用乙腈稀釋并定容至刻度線，搖勻，作為混標(biāo)貯備液；再分別移取混標(biāo)貯備液適量，用乙腈稀釋成質(zhì)量濃度分別為1.0mg/L、10.0mg/L、25.0 mg/L、50.0 mg/L、100.0 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。
2.2 前處理方法
2.2.1試樣溶液：將10g土壤樣品小心轉(zhuǎn)入索氏提取套筒內(nèi)，將套筒置于索氏取器回流管中，在底瓶中加入200 mL丙酮-二氯甲烷混合溶劑回流提取24 h，回流速度在3~4次/h，收集提取液；在玻璃漏斗內(nèi)墊一層玻璃棉或玻璃纖維濾膜，加上適量無(wú)水硫酸鈉將提取液過(guò)濾到濃縮容器中，再用2~3 mL丙酮-二氯甲烷混合溶劑洗滌提取容器并沖洗漏斗，一并收集到濃縮容器中；將提取液濃縮至約0.5 mL，加入約5 mL正己烷并濃縮至約1 mL，將溶劑完全轉(zhuǎn)換為正己烷，待凈化；將固相萃取柱固定在固相萃取裝置上，依次用5mL丙酮和10 mL正己烷活化萃取柱，保持柱頭浸潤(rùn)。在溶劑流干之前，將濃縮后的約1 mL提取液轉(zhuǎn)入柱內(nèi)，開(kāi)始收集流出液，用3 mL正己烷分3次洗滌濃縮容器，洗液全部移入柱內(nèi)，用10 mL丙酮-正己烷混合溶劑進(jìn)行洗脫，收集全部洗脫液。將凈化后的洗脫液濃縮至約0.5 mL，加入約3 mL乙腈，再濃縮至約0.5mL，將溶劑完全轉(zhuǎn)換為乙腈，并用乙腈定容至1.0 mL待測(cè)；同法配制空白試樣和加標(biāo)試樣；
3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 系統(tǒng)適用性
圖1 11種三嗪類農(nóng)藥化合物標(biāo)準(zhǔn)工作溶液測(cè)試色譜圖
表4 11種三嗪類農(nóng)藥化合物標(biāo)準(zhǔn)工作溶液測(cè)試結(jié)果
|
化合物名 |
保留時(shí)間(min) |
理論塔板數(shù) |
分離度 |
|
西瑪津 |
19.107 |
16378 |
8.785 |
|
莠去通 |
24.953 |
18494 |
12.577 |
|
西草凈 |
32.589 |
73665 |
2.777 |
|
阿特拉津 |
33.873 |
93184 |
4.292 |
|
仲丁通 |
35.698 |
123328 |
2.289 |
|
撲滅通 |
36.620 |
134568 |
12.712 |
|
莠滅凈 |
41.329 |
234193 |
1.933 |
|
撲滅津 |
41.969 |
274152 |
5.606 |
|
特丁津 |
43.772 |
294960 |
11.671 |
|
撲草凈 |
48.434 |
165222 |
3.377 |
|
去草凈 |
50.099 |
154810 |
n.a. |
系統(tǒng)適用性顯示：各峰峰型良好，周圍無(wú)雜峰干擾，分離度均大于1.5以上，滿足實(shí)驗(yàn)要求。
3.2 精密度
圖2 11種三嗪類農(nóng)藥化合物6針精密度測(cè)試譜圖(25.0mg/L)
表5 11種三嗪類農(nóng)藥化合物6針精密度測(cè)試結(jié)果(25.0mg/L)
|
化合物名 |
保留時(shí)間RSD（%） |
峰面積RSD（%） |
|
西瑪津 |
0.178 |
0.744 |
|
莠去通 |
0.177 |
0.327 |
|
西草凈 |
0.090 |
0.577 |
|
阿特拉津 |
0.085 |
0.508 |
|
仲丁通 |
0.089 |
0.508 |
|
撲滅通 |
0.079 |
0.437 |
|
莠滅凈 |
0.057 |
0.563 |
|
撲滅津 |
0.054 |
0.674 |
|
特丁津 |
0.042 |
0.540 |
|
撲草凈 |
0.055 |
0.453 |
|
去草凈 |
0.058 |
0.444 |
精密度顯示：連續(xù)進(jìn)樣6次濃度為25.0mg/L三嗪類農(nóng)藥化合物標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，保留時(shí)間重復(fù)性RSD值均在0.18%以下，峰面積重復(fù)性RSD值均在0.75%以下，儀器精密度良好。
3.3 線性與范圍
圖3 部分三嗪類農(nóng)藥化合物標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)試譜圖
表6 11種三嗪類農(nóng)藥化合物線性測(cè)試結(jié)果
|
化合物 |
線性相關(guān)系數(shù)（R） |
|
西瑪津 |
0.99998 |
|
莠去通 |
0.99994 |
|
西草凈 |
0.99995 |
|
阿特拉津 |
0.99996 |
|
仲丁通 |
0.99995 |
|
撲滅通 |
0.99995 |
|
莠滅凈 |
0.99996 |
|
撲滅津 |
0.99995 |
|
特丁津 |
0.99995 |
|
撲草凈 |
0.99995 |
|
去草凈 |
0.99992 |
線性顯示：在1.0~100.0mg/L范圍內(nèi)，11種三嗪類化合物混合標(biāo)準(zhǔn)曲線線性相關(guān)系數(shù)均＞0.9999，線性良好。
3.4 檢出限
圖4 11種三嗪類農(nóng)藥化合物0.12mg/L測(cè)試譜圖
表7 11種三嗪類農(nóng)藥化合物0.12mg/L測(cè)試結(jié)果
|
序號(hào) |
化合物名 |
保留時(shí)間(min) |
峰面積(mAU*s) |
信噪比 |
|
1 |
西瑪津 |
19.142 |
6.593 |
25.651 |
|
2 |
莠去通 |
25.258 |
3.629 |
13.612 |
|
3 |
西草凈 |
32.698 |
5.058 |
28.522 |
|
4 |
阿特拉津 |
33.777 |
6.006 |
35.349 |
|
5 |
仲丁通 |
35.904 |
4.903 |
28.219 |
|
6 |
撲滅通 |
36.828 |
5.303 |
30.152 |
|
7 |
莠滅凈 |
41.434 |
6.869 |
45.123 |
|
8 |
撲滅津 |
41.933 |
6.345 |
49.666 |
|
9 |
特丁津 |
43.738 |
5.999 |
46.696 |
|
10 |
撲草凈 |
48.590 |
6.620 |
31.775 |
|
11 |
去草凈 |
50.210 |
5.570 |
26.891 |
說(shuō)明：根據(jù)上表11種三嗪類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（0.12mg/L）測(cè)試數(shù)據(jù)，3倍信噪比為檢出限計(jì)算可知11種三嗪類農(nóng)藥的的檢出限理論結(jié)果分別為0.014、0.026、0.013、0.010、0.013、0.012、0.008、0.007、0.008、0.011和0.013mg/L。
3.5 回收率
圖5 11種三嗪類農(nóng)藥回收率測(cè)試疊加譜圖
表8 11種三嗪類農(nóng)藥回收率測(cè)試結(jié)果
|
化合物名 |
加標(biāo)樣品 |
標(biāo) |
回收率（%） |
|
峰面積(mAU*s) |
峰面積(mAU*s) |
||
|
西瑪津 |
46.952 |
55.691 |
84.31 |
|
莠去通 |
45.498 |
54.222 |
83.91 |
|
西草凈 |
53.168 |
62.416 |
85.18 |
|
阿特拉津 |
51.781 |
63.023 |
82.16 |
|
仲丁通 |
44.114 |
52.246 |
84.44 |
|
撲滅通 |
44.802 |
52.885 |
84.72 |
|
莠滅凈 |
49.022 |
59.522 |
82.36 |
|
撲滅津 |
60.315 |
66.565 |
90.61 |
|
特丁津 |
48.505 |
57.702 |
84.06 |
|
撲草凈 |
52.919 |
59.818 |
88.47 |
|
去草凈 |
49.977 |
56.725 |
88.10 |
回收率顯示：在土壤樣品中添加1.0mg/L的標(biāo)準(zhǔn)品濃度，按照上述方法進(jìn)行分析，11種三嗪類農(nóng)藥的回收率在82.16%~90.61%之間，回收率良好。
3.6 樣品測(cè)試
圖6 某土壤測(cè)試樣品色譜圖譜
樣品測(cè)試顯示：某土壤樣品中未檢出以上11種三嗪類農(nóng)藥殘留。
4.結(jié)論
本次實(shí)驗(yàn)參考《土壤和沉積物 11種三嗪類農(nóng)藥的測(cè)定 高效液相色譜法》（HJ 1052-2019），采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3400系列配置紫外檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，試驗(yàn)結(jié)果顯示，11種三嗪類農(nóng)藥峰型良好且分離度大于1.5；標(biāo)準(zhǔn)品溶液（25.0mg/L）連續(xù)進(jìn)樣6針保留時(shí)間重復(fù)性RSD值均在0.18%以下，峰面積重復(fù)性RSD值均在0.75%以下，儀器精密度良好；在線性范圍內(nèi)，各組分線性相關(guān)系數(shù)均大于0.9999，線性良好；在土壤樣品中添加1.0mg/L的標(biāo)準(zhǔn)品濃度，11種三嗪類農(nóng)藥的回收率在82.16%~90.61%之間，回收率良好；某土壤樣品中未檢測(cè)出上述11種三嗪類農(nóng)藥殘留。
相關(guān)產(chǎn)品
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